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2022-05-28 18:44:10
動物行為學(xué)檢測

【Morris水迷宮】

(1) 實(shí)驗(yàn)原理

雖然老鼠是天生的游泳健將,但是它們卻厭惡處于水中的狀態(tài),同時游泳對于老鼠來說是十分消耗體力的活動,他們會本能的尋找水中的休息場所。尋找休息場所的行為涉及到一個復(fù)雜的記憶過程,包括收集與空間定位有關(guān)的視覺信息,再對這些信息進(jìn)行處理、整理、記憶、加固、然后再取出,目的是能成功的航行并且找到隱藏在水中的站臺,最終從水中逃脫。

Morris水迷宮(Morris water maze, MWM)實(shí)驗(yàn)是一種強(qiáng)迫實(shí)驗(yàn)動物(大鼠、小鼠)游泳,學(xué)習(xí)尋找隱藏在水中平臺的一種實(shí)驗(yàn),主要用于測試實(shí)驗(yàn)動物對空間位置覺和方向覺(空間定位)的學(xué)習(xí)記憶能力。


(2) 應(yīng)用簡介

學(xué)習(xí)記憶、老年癡呆、海馬/外海馬研究、智力與衰老、新藥開發(fā)/篩選/評價、藥理學(xué)、毒理學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、神經(jīng)生理學(xué)、動物心理學(xué)、行為生物學(xué)及時辰生物學(xué)等多個學(xué)科的科學(xué)研究和計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)(CAI)。


(3) 實(shí)驗(yàn)方法

①將動物(大鼠或小鼠)頭朝池壁放入水中,放入位置隨機(jī)取東、西、南、北四個起始位置之一。記錄動物找到水下平臺的時間(s)。在前幾次訓(xùn)練中,如果這個時間超過60s,則引導(dǎo)動物到平臺。讓動物在平臺上停留10s.

②將動物移開、擦干。必要時將動物(尤其是大鼠)放在150W的白熾燈下烤5min,放回籠內(nèi)。每只動物每天訓(xùn)練4次,兩次訓(xùn)練之間間隔15~20min,連續(xù)訓(xùn)練5天。

③最后一次獲得性訓(xùn)練結(jié)束后的第二天,將平臺撤除,開始60s的探查訓(xùn)練。將動物由原先平臺象限的對側(cè)放入水中。記錄動物在目標(biāo)象限(原先放置平臺的象限)所花的時間和進(jìn)入該象限的次數(shù),以此作為空間記憶的檢測指標(biāo).

④測定動物的工作記憶(working memory)。探查訓(xùn)練結(jié)束后的第二天,開始維持4天的對位訓(xùn)練。將平臺放在原先平臺所在象限的對側(cè)象限,方法與獲得性訓(xùn)練相同。每天訓(xùn)練4次。每次記錄找到平臺的時間和游泳距離以及游泳速度。


(4) 案例展示

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(5) 常見問題

①對比食物驅(qū)動的模型(如放射臂迷宮),水迷宮實(shí)驗(yàn)的最大優(yōu)點(diǎn)在于,動物具有更大的、逃離水環(huán)境的動機(jī)。而且不必禁食,特別適合老年動物的測試。加上它對衰老引起的記憶減弱尤其敏感,因此,水迷宮最常用于老年動物記憶的研究。

②每天在固定時間測試。操作輕柔,避免不必要的應(yīng)激刺激。

③當(dāng)與其他同類實(shí)驗(yàn)相比較時,要注意到動物的性別、品系、泳池的尺寸和水溫等多種因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。此外,當(dāng)以游泳速度作為觀察指標(biāo)時,要考慮到動物的體重、年齡以及骨骼肌發(fā)育狀況等對游泳速度可能造成影響。

④用老年動物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時,應(yīng)確認(rèn)動物的游泳能力和視力不因年齡增大而影響行為操作。其方法如下:將平臺露出水面以使動物能夠看見平臺。動物放入泳池后如毫無困難地直接游向平臺,說明動物的游泳能力和視力均正常,可以開始實(shí)驗(yàn)。

⑤游泳對動物是一個較大的應(yīng)激刺激,可引起神經(jīng)內(nèi)分泌的變化。這些變化可能對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成干擾。對老年動物,嚴(yán)重時可誘發(fā)心血管疾病而導(dǎo)致昏厥甚至猝死。因此,必要時可將動物多次放入泳池或適當(dāng)延長其游泳時間以增加動物對游泳的適應(yīng)能力。

⑥當(dāng)用實(shí)驗(yàn)染料攪渾泳池的水時,要定期換水以免水腐敗變質(zhì)。



【動物跑臺實(shí)驗(yàn)】

(1) 實(shí)驗(yàn)原理

動物跑臺實(shí)驗(yàn)主要利用動物跑臺讓鼠類小動物作跑步運(yùn)動訓(xùn)練,可取代傳統(tǒng)的游泳訓(xùn)練,使訓(xùn)練強(qiáng)度指標(biāo)更加準(zhǔn)確。


(2) 應(yīng)用簡介

動物跑臺實(shí)驗(yàn)是體能、耐力、運(yùn)動損傷、營養(yǎng)、藥物、生理和病理等實(shí)驗(yàn)的必要的手段之一。


(3) 實(shí)驗(yàn)方法

在運(yùn)動訓(xùn)練的過程中,密切觀察大鼠的運(yùn)動表現(xiàn)和運(yùn)動能力的變化,避免運(yùn)動性過度疲勞的發(fā)生。在實(shí)驗(yàn)的過程中,每天給大鼠加料、換水、打掃清潔,每周稱體重和稱量大鼠的飲食量一次。

1)打開軟件,點(diǎn)擊“開始設(shè)置”按鈕(此時開始設(shè)置按鈕變?yōu)榫G色),此時將導(dǎo)入上次設(shè)置的參數(shù)。

    ①總時間:設(shè)定實(shí)驗(yàn)總時間,可以通過中間的輸入框直接用鍵盤輸入,也可以通過最左邊的按鈕調(diào)節(jié),步進(jìn)值為1分鐘。

    ②跑步時間:設(shè)定動物跑動的時間,設(shè)置方法與總時間的設(shè)置一樣。

    ③休息時間:設(shè)定動物休息的時間,設(shè)置方法與總時間的設(shè)置一樣。

    ④刺激設(shè)定:設(shè)定電刺激的電流大小,通過左邊按鈕設(shè)置,步進(jìn)值為0.05mA。

    ⑤選擇COM端口:選擇串口線與計(jì)算機(jī)的通信端口,默認(rèn)為COM1。

    ⑥速度設(shè)定:調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速,步進(jìn)值為1m/min。支持實(shí)時調(diào)節(jié)。

    ⑦聲音刺激:控制聲音刺激的有無,實(shí)驗(yàn)開始之后實(shí)時控制。

    ⑧光刺激:控制光刺激的有無,實(shí)驗(yàn)開始之后實(shí)時控制。

    ⑨電刺激:控制電刺激的有無,實(shí)驗(yàn)開始之后實(shí)時控制。

2)參數(shù)設(shè)定完成之后,點(diǎn)擊“開始實(shí)驗(yàn)”按鈕。此時電機(jī)啟動,數(shù)據(jù)顯示在右邊的藍(lán)色區(qū)域內(nèi),同時以表格形式顯示在右下角區(qū)域。

3)實(shí)驗(yàn)結(jié)束按鈕可以隨時停止實(shí)驗(yàn),試驗(yàn)時間到也會停止實(shí)驗(yàn)。


(4) 案例展示

動物行為2.png

(5) 常見問題

①購進(jìn)的大小鼠首先在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行一周左右的生活環(huán)境的適應(yīng)性飼養(yǎng)。

②第二周進(jìn)行跑臺適應(yīng)性運(yùn)動訓(xùn)練,做正式實(shí)驗(yàn)時應(yīng)剔除個別始終拒跑的鼠。

③正式實(shí)驗(yàn)時,科研人員按研究項(xiàng)目的需要,設(shè)定運(yùn)動速度、跑臺坡度角等進(jìn)行動物運(yùn)動跑臺實(shí)驗(yàn)。



【懸尾實(shí)驗(yàn)】

(1) 實(shí)驗(yàn)原理

將實(shí)驗(yàn)動物通過固定動物尾部使其頭向下懸掛,動物在該環(huán)境中拼命掙扎試圖逃跑又無法逃脫,從而提供了一個無可回避的壓迫環(huán)境,一段時間的實(shí)驗(yàn)后, 記錄處于該環(huán)境的動物產(chǎn)生絕望的不動狀態(tài)過程中的一系列參數(shù),動物的表現(xiàn)出的這種典型的“不動狀態(tài)”,反映了一種被稱之為“行為絕望狀態(tài)”,

懸尾實(shí)驗(yàn)(The Tail Suspension Test,TST)是一項(xiàng)小鼠行為測試,可用于篩選潛在的抗抑郁物,以及評估預(yù)期會影響抑郁相關(guān)行為的實(shí)驗(yàn)方法。


(2) 應(yīng)用簡介

這種行為絕望模型與抑郁癥類似,而且對絕大多數(shù)抗抑郁物敏感,而且其藥效與臨床藥效顯著相關(guān),所以被廣泛用于抗抑郁物的初選。


(3) 實(shí)驗(yàn)方法

有專門的懸尾測試儀,主要用于抗抑郁、鎮(zhèn)靜以及止痛類藥物的研究。該儀器適用于大鼠、小鼠或其他實(shí)驗(yàn)室動物,通過固定動物尾部使其頭向下懸掛,記錄處于該環(huán)境的動物產(chǎn)生絕望的不動狀態(tài)過程中的一系列參數(shù)。

方法 :將小鼠尾部后1/3處用膠帶固定,懸掛于支架上,頭部距離臺面15cm,進(jìn)行攝像,攝像背景與小鼠毛色呈明顯反差,白色小鼠采用黑色背景。計(jì)時6min后停止,利用小動物行為學(xué)分析軟件:用Smart 2.5軟件對小鼠后四分鐘(3-6min)的不動時間進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。


(4)案例展示

動物行為3.png

(5)  常見問題

1)TST 懸尾實(shí)驗(yàn)不建議用較重的大鼠,因?yàn)榇笫笾荒芡ㄟ^它們的尾巴來支持它們的體重,這對大鼠來說是痛苦的。同樣的道理,應(yīng)該注意避免使用異常重的小鼠(例如用于模擬肥胖的小鼠),在這種情況下,實(shí)驗(yàn)者應(yīng)該尋找替代性的測試,例如強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)。

2)動物從居住環(huán)境帶入實(shí)驗(yàn)環(huán)境應(yīng)適應(yīng)一段時間,通常至少一個小時。

3)實(shí)驗(yàn)環(huán)境應(yīng)保持安靜,突然大的噪音會使小鼠驚慌失措。

4)使用軟件分析時,選擇合適對比度的背景:白鼠使用黑色背景,黑鼠使用白色背景;也可選擇使用由上海欣軟信息科技有限公司生產(chǎn)的帶背光板的專業(yè)實(shí)驗(yàn)設(shè)備;對老鼠的顏色沒有要求,更可拍攝出高質(zhì)量,高對比度的實(shí)驗(yàn)錄像。

5)每只小鼠的實(shí)驗(yàn)空間多大?參考空間在 55cm高*15cm寬*11.5 cm 左右,多通量實(shí)驗(yàn)時,為防止動物彼此觀察或互相影響,中間用隔板隔開;動物懸掛在隔間中間,寬度和深度足夠大,不能與墻壁接觸。

6)懸掛后動物鼻尖與設(shè)備地板之前的距離多少?參考距離在 20~25 cm 左右。

7)底部建議放置一個可拆卸的拖盤,收集糞便或尿液。

8)懸掛用的膠帶應(yīng)牢固地粘貼在小鼠尾部和懸掛桿上,并且足夠堅(jiān)固以承受正在測試的小鼠的重量。但是,膠帶不應(yīng)該過于粘滯,因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)結(jié)束會從尾部移除。膠帶尺寸應(yīng)統(tǒng)一,長度 17 厘米,從一端 2 厘米做標(biāo)記。這個 2 厘米的部分用于將膠帶連接到尾部,而剩余的 15 厘米用于懸掛小鼠;膠帶應(yīng)貼在尾部的尾端,尾部留 2-3 毫米的距離。

9)尾巴攀爬阻止器,小鼠在實(shí)驗(yàn)過程,會出現(xiàn)追求和攀爬它們自己的尾巴的現(xiàn)象,這是個普遍的問題。解決方法很簡單,而且非常有效:將一段塑料管切成 4 cm 長中空圓柱體(內(nèi)徑 1.3 cm 左右,1.5 g)放置在小鼠尾巴周圍就能防止這種尾巴爬行行為。注意的是,在沒有使用阻止器之前,已經(jīng)成功爬上尾巴的小鼠知道逃生是可能的。因此應(yīng)將這類小鼠排除。

10)分析時僅有前肢但沒有后肢介入的小動作可判斷為不動;因慣性產(chǎn)生的擺動可判斷為不動;上海欣軟信息科技有限公司開發(fā)的Super系列行為學(xué)系統(tǒng)之SuperTst懸尾實(shí)驗(yàn)分析軟件可識別動物頭部、尾巴、前肢、后肢、重心等部位,準(zhǔn)確區(qū)分并識別出運(yùn)動和不動行為,

11)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后(通常是 6 分鐘),將動物放回鼠籠,應(yīng)輕輕將膠帶從尾巴上拉下來,不要從尾巴上撕扯膠帶,避免給動物帶來痛苦;

12)清潔用品,每次實(shí)驗(yàn)完成,收集糞便和尿液,徹底擦拭懸掛盒。



【八臂迷宮實(shí)驗(yàn)】

(1) 實(shí)驗(yàn)原理

八臂迷宮(8-Arm Maze)用來檢測藥物或大腦受損狀態(tài)下學(xué)習(xí)和記憶方面的表現(xiàn),它由八個完全相同的臂組成,這些臂從一個中央平臺放射出來,所以又被稱為放射迷宮(Radial Maze)。

每個臂盡頭有食物提供裝置,根據(jù)分析動物取食的策略即進(jìn)入每臂的次數(shù)、時間、正確次數(shù)、錯誤次數(shù)、路線等參數(shù)可以反映出實(shí)驗(yàn)動物的空間記憶能力。


(2) 應(yīng)用簡介

八臂迷宮操作簡便、可行,而且能區(qū)分短期的工作記憶和長期的參考記憶,現(xiàn)已被廣泛用于學(xué)習(xí)記憶認(rèn)知實(shí)驗(yàn)功能評價。ZH-3000八臂迷宮主要的分析主要指標(biāo)為 名稱、分組、工作記憶錯潛伏期、參考記憶錯誤潛伏期、總正確次數(shù)、總進(jìn)臂次數(shù)、工作記憶錯誤次數(shù)、參考記憶錯誤次數(shù)、正確潛伏期、正確率、工作記憶錯誤率、參考記憶錯誤率、首錯前正確次數(shù)、測試時間、軌跡圖等。


(3) 實(shí)驗(yàn)方法

1)動物適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境1周后,稱重,禁食24小時。此后每天訓(xùn)練結(jié)束后限制性地給予正常食料(據(jù)體重不同,大鼠16-20g,小鼠2-3g),以使體重保持在正常進(jìn)食大鼠的80%~85%。

2)第二天,迷宮各臂及中央?yún)^(qū)分撒著食物顆粒(每只4~5粒,直徑約3~4mm)。然后,同時將4只動物置于迷宮中央(通往各臂的門打開),讓其自由攝食、探究10min。

3)第三天,重復(fù)第二天的訓(xùn)練。這一過程讓動物在沒有很強(qiáng)的應(yīng)激條件下熟悉迷宮環(huán)境。

4)第四天起,動物單個進(jìn)行訓(xùn)練:在每個臂靠近外端食盒處各放一顆食粒,讓動物自由攝食。食粒吃完或10min后將動物取出。

5)第五天,將食物放在食盒內(nèi),重復(fù)前一天的訓(xùn)練,一天2次。

6)第六天以后,隨機(jī)選4個臂,每個臂放一顆食粒;各臂門關(guān)閉,將動物放在迷宮中央;30s后,臂門打開,讓動物在迷宮中自由活動并攝取食粒,直到動物吃完所有4個臂的食粒。如經(jīng)10min食粒仍未吃完,則實(shí)驗(yàn)終止。


(4)案例展示

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(5) 常見問題

1)小鼠放射迷宮設(shè)備和實(shí)驗(yàn)程序與大鼠類似,但迷宮規(guī)格應(yīng)比大鼠迷宮小1/4~1/2,以免增加小鼠行為操作難度。

2)本實(shí)驗(yàn)也可只用來測定工作記憶。方法中唯一不同的是,在所有放射臂均放置食粒,而不是只選4個臂放置食粒。

3)慢性應(yīng)激對動物的迷宮操作可產(chǎn)生影響,且存在性別差異。經(jīng)過慢性應(yīng)激以后,雄性大鼠記憶力減弱,表現(xiàn)為記憶錯誤頻率增加;雄性大鼠的空間記憶反而增強(qiáng),表現(xiàn)為錯誤頻率減少。

4)即使在限制進(jìn)食條件下,也應(yīng)讓大鼠體重每周增加5g,以免動物因營養(yǎng)不良而患病。剔除身體狀態(tài)不良的動物。

5)迷宮周圍的任何一件物品均可被動物用來作為空間定為的標(biāo)志。去除或移動這些標(biāo)志可能使動物操作困難并降低迷宮臂選擇的準(zhǔn)確性。

6)根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡牟煌詫m放射臂的數(shù)目可不同,包括8、16、24、32、40和48臂迷宮。迷宮臂越少要求動物記住探究過的臂也越小,動物的行為操作就越簡單。增加臂的數(shù)目一方面增加了對動物空間記憶的要求,另一方面也引入了更多的、有必要考慮的干擾因素(例如過去的迷宮學(xué)習(xí)對目前所測記憶的影響)。所以,通常使用8臂放射迷宮,既可減少不必要的、過多臂的干擾,又可縮短訓(xùn)練和測試所花的時間。?

7)所用食物通常為小塊的、帶巧克力味(動物最喜歡的味道之一)或甜味的早餐圈(每塊10mg);也可用液體食物(如巧克力奶或水)。后者對于測試某些影響動物對固體食物吞咽的藥物(抗膽堿能藥)尤為實(shí)用。?

8)影響動物迷宮操作主要有兩大因素:對迷宮或觀察者的恐懼與動物探究習(xí)性和已知放在迷宮臂內(nèi)食物的驅(qū)使??謶忠蛩剡^強(qiáng)會阻止動物的迷宮操作,使動物始終停留在迷宮的某一個地方而不去探究。缺乏對食物的渴求也會產(chǎn)生類似結(jié)果,增加對動物的撫摸,必要時加高迷宮臂的側(cè)墻,有助于減少動物的恐懼。如食物的驅(qū)使作用不足,可減少食物量,但必須同時監(jiān)測體重和一般身體狀況。通常大鼠體重不應(yīng)低于禁食前的80%;對多數(shù)大鼠,體重降低15%即可。?

9)與水迷宮不同,放射臂迷宮適合反復(fù)測試或長期記憶的測試。一般認(rèn)為,工作記憶代表短期記憶,參考記憶代表長期記憶。



【大小鼠明暗箱(黑白箱)實(shí)驗(yàn)】

(1) 實(shí)驗(yàn)原理

利用小鼠或大鼠具有趨暗避明的習(xí)性設(shè)計(jì)的裝置,一半是暗室,一半是明室,中間有一小洞相連。暗室底部鋪有通電的銅柵。動物進(jìn)入暗室即受到電擊。本實(shí)驗(yàn)簡單易行,反應(yīng)箱越多,同時訓(xùn)練的動物越多。以潛伏期為指標(biāo),動物的差異性比較小。對記憶過程特別是記憶再現(xiàn)有較高的敏感度。

在明暗箱中,小鼠或大鼠喜歡在暗箱活動,但動物的探究習(xí)性促使其試圖去探究明箱。然而,明箱的亮光刺激又抑制動物在明箱的探究活動。


(2) 應(yīng)用簡介

被廣泛應(yīng)用于學(xué)習(xí)記憶、老年癡呆、海馬/外海馬研究、智力與衰老、新藥開發(fā)/篩選/評價、藥理學(xué)、毒理學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、動物心理學(xué)及行為生物學(xué)等多個學(xué)科的科學(xué)研究和計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)等領(lǐng)域,在世界上已經(jīng)得到廣泛地認(rèn)可,是醫(yī)學(xué)院校開展行為學(xué)研究尤其是學(xué)習(xí)與記憶研究的優(yōu)選經(jīng)典實(shí)驗(yàn)。


(3) 實(shí)驗(yàn)方法

明暗箱(45cm*27cm*27cm)中暗箱占三分之一,頂部加蓋;明箱占三分之二,亮光照明,兩箱之間的隔墻有一個7.5cm*7.5cm的門洞供動物穿過。明暗箱置于Animex活動計(jì)數(shù)儀上,可同時記錄動物的運(yùn)動活性。動物給藥后一定時間置于明箱中央,記錄10min內(nèi)穿箱次數(shù)及分布在明箱和暗箱的滯留時間。

Shimada等人1995年對明暗箱的裝置進(jìn)行了大膽的改進(jìn),在一個40cm*40cm*12cm的有機(jī)玻璃敞箱中央安裝一個10cm*10cm*12cm的暗箱,因而構(gòu)成另兩對角的“L”形跑道(明箱),每一個暗箱各有一個3.5cm*3.5cm的洞口與兩側(cè)的跑道相連。裝置上方裝有電視掃描和攝像系統(tǒng),由此觀察小鼠的穿箱次數(shù)、在明箱滯留時間及運(yùn)動活性。


(4)案例展示

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(5) 常見問題

1)有抗焦慮的均可以增加動物的穿箱次數(shù)以及在明箱的滯留時間,非抗焦慮劑則無此作用。

2)在此模型上抗焦慮劑相對使用強(qiáng)度與臨床試驗(yàn)結(jié)果一致。

3)Shimada改良明暗箱實(shí)驗(yàn)敏感性好,無論是經(jīng)典的抗焦慮劑或者致焦慮劑,還是丁螺環(huán)酮等新型抗焦慮劑,在此模型上都呈陽性結(jié)果。



【條件性位置偏愛實(shí)驗(yàn)】

(1) 實(shí)驗(yàn)原理

環(huán)境刺激與作為條件性強(qiáng)化的某種藥物搭配,使動物在環(huán)境刺激與藥物之間建立聯(lián)系,形成操作性行為,從而可以觀察動物對搭配環(huán)境的偏愛程度來測定搭配藥物的強(qiáng)化效應(yīng)。條件性位置偏愛實(shí)驗(yàn)可以與各種具有依賴性的藥物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。


(2) 應(yīng)用簡介

條件性位置偏愛實(shí)驗(yàn)(Conditioned Place Preference, CPP)實(shí)驗(yàn)是目前評價藥物精神依賴性的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)?zāi)P停彩菑V泛應(yīng)用于尋找抗覓藥行為的有效工具。


(3) 實(shí)驗(yàn)方法

該實(shí)驗(yàn)將實(shí)驗(yàn)動物(大鼠、小鼠)置于條件性位置偏愛箱的白色觀察區(qū),并給予精神依賴性藥物(例如嗎啡),然后觀察實(shí)驗(yàn)動物在條件性位置偏愛箱的黑色區(qū)和白色區(qū)的活動情況,白色區(qū) 、黑色區(qū)以及其中的灰色區(qū)之間有小門可供動物自由穿梭。動物每次處于給藥區(qū)就會在藥物獎賞性效應(yīng)的作用下對黑色和白色區(qū)域產(chǎn)生位置上的偏好,其程度與藥物的精神依賴性相關(guān)。


(4)案例展示

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動物行為7.png

(5) 常見問題

①實(shí)驗(yàn)前充分觸摸大鼠,動物必須對實(shí)驗(yàn)者和實(shí)驗(yàn)環(huán)境完全適應(yīng)沒有恐懼感。

②如果動物掉落在地,最好將此動物剔除。?

③注意控制實(shí)驗(yàn)中其他干擾因素。


【社會交互行為測試】

(1) 實(shí)驗(yàn)原理

動物交際實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)設(shè)計(jì)是在小鼠熟悉了環(huán)境后,檢測小鼠靠近位于實(shí)驗(yàn)箱中裝有另一只陌生小鼠的金屬籠的時間,來判斷小鼠的社交能力。在實(shí)驗(yàn)中,通常會比較小鼠靠近關(guān)有熟悉小鼠的金屬籠時間與陌生小鼠金屬籠的時間,來判斷動物的社交能力。


(2) 應(yīng)用簡介

社會交互行為測試(3-Chambered Social Test)是最常用的用于評估自閉癥行為的實(shí)驗(yàn)。


(3) 實(shí)驗(yàn)方法

在小鼠熟悉了環(huán)境后,檢測小鼠靠近位于實(shí)驗(yàn)箱中裝有另一只陌生小鼠的金屬籠的時間,來判斷小鼠的社交能力。在實(shí)驗(yàn)中,通常會比較小鼠靠近關(guān)有熟悉小鼠的金屬籠時間與陌生小鼠金屬籠的時間,來判斷動物的社交能力。


(4)案例展示

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(5) 常見問題

①實(shí)驗(yàn)前充分觸摸大鼠,動物必須對實(shí)驗(yàn)者和實(shí)驗(yàn)環(huán)境完全適應(yīng)沒有恐懼感。

②如果動物掉落在地,最好將此動物剔除。?

③注意控制實(shí)驗(yàn)中其他干擾因素。



【孔板實(shí)驗(yàn)】

(1) 實(shí)驗(yàn)原理

該實(shí)驗(yàn)是利用新奇(curiosity)和恐懼(fear)兩個因素來控制動物在新環(huán)境下的行為,用逃避(escapes) 來反映這兩個因素的作用結(jié)果。動物反復(fù)鉆頭(head一dipping)反映其新奇感和對逃避的渴望。一般認(rèn)為,藥物在不影響動物運(yùn)動活性的劑量下,增加鉆頭次數(shù)和時間,表現(xiàn)為抗焦慮作用,減少鉆頭次數(shù)和時間則為致焦慮作用。


(2) 應(yīng)用簡介 

孔板實(shí)驗(yàn)被廣泛用于藥效研究。


(3) 實(shí)驗(yàn)方法

大鼠和小鼠的實(shí)驗(yàn)裝置有所不同。大鼠裝置為一個66cm x 56cm x 47cm的木箱,底板有4個直徑為3 . 8cm、深1 cm的等大圓孔,其中兩孔離最近壁14cm,另兩孔17cm,孔板水平抬高12em;小鼠木箱為44cm x 40cm x 27cm ,  4個孔的孔徑均為3cm,厚1. 8cm,每孔中心離最近壁的距離為l0cm。 80年代之后,孔板箱壁及每一孔周邊都裝有紅外光電管,并與微機(jī)相聯(lián),這樣可同時自動記錄動物的鉆頭次數(shù)和鉆頭時間、運(yùn)動活性及站立數(shù)等多項(xiàng)指標(biāo),既提高了工作效率,又增加了實(shí)驗(yàn)的可靠性。實(shí)驗(yàn)用雄性成年的大鼠或小鼠。將動物置于孔板中央,背朝觀察者。動物兩眼消失在洞中為一次鉆頭(a head一dip),記錄5-10min的鉆頭次數(shù)及鉆頭持續(xù)時間。


(4)案例展示

動物行為10.png

(5) 常見問題

①對孔板箱的形狀和大小沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn),但常采用方型,其邊長在大鼠一般60cm,小鼠為40c m左右。

②孔的數(shù)量早期多為16孔,現(xiàn)在通常采用4孔板。

③動物在上午的鉆頭數(shù)往往比下午多。因此,應(yīng)盡量在每天固定的時間內(nèi)做實(shí)驗(yàn)。

④本實(shí)驗(yàn)對致焦慮藥(如BDZ受體反相激動劑)引起探究性鉆頭的特異性降低結(jié)果較為一致,而某些缺乏抗焦慮作用的藥物(如BDZ受體拮抗劑氟馬西尼)反可使探究性鉆頭增加。故在篩選未知藥物時應(yīng)結(jié)合其它焦慮模型進(jìn)行評價。


【高價十字迷宮】

(1) 實(shí)驗(yàn)原理

高架十字迷宮(High plus maze)是利用動物對新異環(huán)境的探究特性和對高懸敞開臂的恐懼形成矛盾沖突行為來考察動物的焦慮狀態(tài)。

高架十字迷宮具有一對開臂和一對閉臂,嚙齒類動物由于嗜暗性會傾向于在閉臂中活動,但出于好奇心和探究性又會在開臂中活動,在面對新奇刺激時,動物同時產(chǎn)生探究的沖動與恐懼,這就造成了探究與回避的沖突行為,從而產(chǎn)生焦慮心理。而抗焦慮藥物能明顯增加進(jìn)入開臂的次數(shù)與時間,十字迷宮距離地面較高,相當(dāng)于人站在峭壁上,使實(shí)驗(yàn)對象產(chǎn)生恐懼和不安心理。


(2) 應(yīng)用簡介

高架十字迷宮被廣泛應(yīng)用于新藥開發(fā)、篩選、評價、藥理學(xué)、毒理學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、動物心理學(xué)及行為生物學(xué)等多個學(xué)科的科學(xué)-研究和計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)等領(lǐng)域,是開展行為學(xué)研究尤其是焦慮抑郁研究的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)。


(3) 實(shí)驗(yàn)方法

實(shí)驗(yàn)開始時將小鼠從中央格面向閉合臂放入迷宮,記錄5分鐘內(nèi)的活動情況。觀察指標(biāo)包括:開放臂進(jìn)入次數(shù)(必須有兩只前瓜進(jìn)入臂內(nèi)),開放臂停留時間,閉合臂進(jìn)入次數(shù),閉合臂停留時間。計(jì)算開放臂停留時間比例,開放臂進(jìn)入次數(shù)比例,高架十字迷宮中總進(jìn)入次數(shù)。實(shí)驗(yàn)完成后將小鼠取出,將兩臂清理干凈,噴灑酒精除去氣味,最后用Xeye動物行為學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。


(4) 案例展示

動物行為11.png

(5) 常見問題

①實(shí)驗(yàn)前充分觸摸大鼠,動物必須對實(shí)驗(yàn)者和實(shí)驗(yàn)環(huán)境完全適應(yīng)沒有恐懼感。

②如果動物掉落在地,最好將此動物剔除。?

③注意控制實(shí)驗(yàn)中其他干擾因素。



【服務(wù)流程

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