精品国产Ⅴ无码大片在线观看81|狠狠色噜噜狠狠狠狠7777米奇|久久天天躁狠狠躁夜夜2020一|2021最新亚洲国产成人a在线|国产毛片久久久久久国产毛片不卡|99久久2023re6热精品首页|久久久精品国产亚洲未满成18免费网站

【實驗原理】

克隆形成實驗是腫瘤細胞學研究中的一種常用技術(shù)，其原理是將細胞分離成單細胞懸液，在培養(yǎng)基上接種培養(yǎng)，根據(jù)集落形成數(shù)量和大小來檢測細胞增殖能力和致瘤性。該實驗可用來研究腫瘤細胞的增殖能力、侵襲性，探討細胞對不同殺傷因素的敏感性。

【應用簡介】

軟瓊脂克隆形成實驗可用于：

①細胞分化的基礎(chǔ)研究；

②臨床腫瘤治療的療效檢驗等方面。

當單個細胞在體外增殖6代以上，其后代所組成的細胞群體，成為集落或克隆。

平板細胞克隆適用于貼壁生長的細胞和正常培養(yǎng)的細胞可用于：

①細胞增殖實驗

②細胞群體依賴性檢測

【案例展示】

DU145細胞克隆形成的圖片（相機左，顯微鏡右）

【常見問題】

1平板克隆實驗

1）實驗成功的關(guān)鍵是細胞懸液的制備和接種密度。細胞一定要分散得好，不能有細胞團，接種密度不能過大。

2）細胞在進行克隆形成實驗時要求有95%以上的分散度，否則結(jié)果的準確度會受到很大影響。

3）一般初代培養(yǎng)細胞克隆形成率弱，傳代細胞系強；二倍體細胞克隆形成率弱，轉(zhuǎn)化細胞系強；正常細胞克隆形成率弱，腫瘤細胞強。

軟瓊脂培養(yǎng)克隆形成試驗

1）軟瓊脂克隆的操作相對復雜，在實驗過程中一定要注意無菌操作。

2）在將瓊脂于培養(yǎng)基混勻時，要注意瓊脂溫度，而且動作要迅速，避免局部結(jié)塊。

3）制備好底層瓊脂后，要待其完全凝固后再澆上上層瓊脂。

4）通常下層1.2% Argrose快些鋪，略有不平是沒有太大關(guān)系的，上層0.7% Argrose與細胞混合時水浴不大于40度，小心均勻的鋪，37度不會那么快凝固，孵箱里過幾天就好了。

5）軟瓊脂克隆形成試驗方法簡單，適用于不貼壁生長的細胞。適宜底物為玻璃的、塑料瓶皿。試驗成功的關(guān)鍵是細胞懸液的制備和接種密度。細胞一定要分散得好，不能有細胞團，接種密度不能過大，接種細胞的密度每平方厘米不超過35個，一般6cm的平皿接種1000個細胞。

6）軟瓊脂培養(yǎng)法常用檢測腫瘤細胞和轉(zhuǎn)化細胞系，正常細胞在懸浮狀態(tài)下不能增殖，不適用于軟瓊脂克隆形成試驗。 

【服務流程】