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2022-06-09 09:36:32
免疫熒光

一、實(shí)驗(yàn)原理

免疫熒光(IF),是應(yīng)用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過熒光標(biāo)記抗體對(duì)組織細(xì)胞內(nèi)抗原進(jìn)行定位、定性及定量的研究。

免疫學(xué)的基本反應(yīng)是抗原-抗體反應(yīng)。由于抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性,所以當(dāng)抗原抗體發(fā)生反應(yīng)時(shí),只要知道其中的一個(gè)因素,就可以查出另一個(gè)因素。免疫熒光技術(shù)就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標(biāo)記在抗體(或抗原)上,與其相應(yīng)的抗原(或抗體)結(jié)合后,在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)一種特異性熒光反應(yīng)。

 

二、應(yīng)用簡(jiǎn)介

目前主要可以對(duì)石蠟切片、冰凍切片、細(xì)胞爬片、組織芯片進(jìn)行免疫熒光檢測(cè)。

免疫熒光技術(shù)可用于:(1)研究特異蛋白抗原在細(xì)胞內(nèi)分布;(2)對(duì)抗原進(jìn)行細(xì)胞定位;(3)對(duì)特定抗原進(jìn)行定量檢測(cè)

 

三、實(shí)驗(yàn)方法

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四、樣本送檢要求

免疫2.png

五、案例展示

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六、常見問題

1、無/弱染色

烤片溫度過高,推薦56℃-60℃1-2h;
一抗是否適用固定液和石蠟切片,使用濃度是否過低,孵育是否時(shí)間過短等。

2、非特異性背景染色

是否滅活內(nèi)源性過氧化物酶;
孵育過程中干片;
抗原熱修復(fù)過度。

3、染色過深

一抗?jié)舛冗^高;
染色試濃度過高或孵育時(shí)間過長(zhǎng);
染色劑濃度過高或孵育時(shí)間過長(zhǎng)。

  

七、服務(wù)流程

【服務(wù)流程】.png