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科研技術(shù)服務(wù)
2022-06-09 09:36:32
免疫熒光
一、實驗原理
免疫熒光（IF），是應(yīng)用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過熒光標(biāo)記抗體對組織細胞內(nèi)抗原進行定位、定性及定量的研究。
免疫學(xué)的基本反應(yīng)是抗原-抗體反應(yīng)。由于抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性，所以當(dāng)抗原抗體發(fā)生反應(yīng)時，只要知道其中的一個因素，就可以查出另一個因素。免疫熒光技術(shù)就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標(biāo)記在抗體（或抗原）上，與其相應(yīng)的抗原（或抗體）結(jié)合后，在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)一種特異性熒光反應(yīng)。
二、應(yīng)用簡介
目前主要可以對石蠟切片、冰凍切片、細胞爬片、組織芯片進行免疫熒光檢測。
免疫熒光技術(shù)可用于：（1）研究特異蛋白抗原在細胞內(nèi)分布；（2）對抗原進行細胞定位；（3）對特定抗原進行定量檢測
三、實驗方法
四、樣本送檢要求
五、案例展示
六、常見問題
1、無/弱染色
烤片溫度過高，推薦56℃-60℃1-2h；
一抗是否適用固定液和石蠟切片，使用濃度是否過低，孵育是否時間過短等。
2、非特異性背景染色
是否滅活內(nèi)源性過氧化物酶；
孵育過程中干片；
抗原熱修復(fù)過度。
3、染色過深
一抗?jié)舛冗^高；
染色試濃度過高或孵育時間過長；
染色劑濃度過高或孵育時間過長。
七、服務(wù)流程
